Человеческие тест набора 96 HBeAb Elisa/набор
Набор HBeAb ELISA
CatalogNo.: BE104A
Энзим-соединенный assay иммуносорбента для антитела обнаружения против HBeAg в сыворотке или плазме
1. СВОДКА И ПРИНЦИП ТЕСТА
Присутсвие антитела против антигена Гепатита B вирусного e использовано как индикатор для (1) предыдущего antigenemia HBs перед пиком вирусной репликации и (2) предыдущего выздоровления когда HBeAg склоняло под обнаруженными уровнями. Также полезно подтвердить сероконверсию. Сероконверсия от позитивности HBeAg к анти--HBe позитивности показывает уменьшенный уровень заразного вируса потому что репликация вируса уменьшала.
РЕАГЕНТЫ
2 . Материалы обеспеченные с наборами:
1.Microtiter хорошо покрытое с очищенное анти--HBe: 96 тестов
контроль 2.Negative: Одна пробирка 0. анти--HBe отрицательных контролей 5ml.
контроль 3.Positive: Одна пробирка 0. анти--HBe надежных управлений 5ml.
конъюгат 4.Enzyme: 6 ml содержа HRP-спрягать-анти--HBe-HBeAg комплекс для 96 тестов.
концентрат буфера 5.Wash (20 x): 20 ml для 96 тестов. Буфер должен быть разбавлен 20 раз с дистиллированной водой перед использованием.
6.Substrate решение a: 6 субстрат ml HRP для 96 тестов.
7.Substrate решение b: 6 субстрат ml TMB Chromagen для 96 тестов.
решение 8.Stop: Одна бутылка 6 ml масляной серной кислоты 2N.
3. ПРОЦЕДУРА ПО ASSAY
- Позвольте всем реагентам достигнуть комнатную температуру перед использованием.
- Проверите концентрат буфера мытья для присутсвия кристаллов соли. Если кристаллы формировали в решении, то resolubilize путем греть на 37℃ до тех пор пока кристаллы не будут растворять. Dilute сконцентрировал 1:19 буфера мытья с ddH2O. Используйте только чистые сосуды для того чтобы разбавить буфер.
- Для каждого теста, установите 2 положительных и 2 отрицательных контроля. Распределите одно падение (ul 50) надежного управления так же, как отрицательного контроля в дубликате в соответственно колодцы. Установите один черный колодец как управление предпосылки, и 50ul образцов сыворотки или плазмы в соответственно колодцы.
- Добавьте одно падение (ul 50) конъюгата энзима к каждому колодцу. Смешайте его нежно путем завихряться плита microtiter на плоском стенде на 1 MIN. Не добавьте конъюгат энзима к пробелу хорошо.
- Установите плиту microtiter в humidified коробку и инкубируйте на 37°C на 30 MIN.
- Помойте каждое хорошо 5 раз путем заполнять каждый колодец с разбавленным буфером мытья, тогда переверните плиту энергично для того чтобы получить всю воду вне и преградить оправу каждого колодца на бумаге вещество-поглотителя в течение нескольких секунд.
- Добавьте одно падение (ul 50) решения a субстрата к каждому колодцу, тогда добавьте одно падение (ul 50) решения b субстрата к каждому колодцу. Смешайте нежно и инкубируйте на 37°C на 15 MIN.
- Добавьте одно падение (ul 50) решения стопа к каждому колодцу для того чтобы остановить реакцию цвета. Прочитанное O.D. на 450 nm (450 nm/630 nm) с читателем EIA.