Bioneovan RUO HAV- IgG ELISA представляет собой иммуноанализ, связанный с ферментами in vitro, который используется для выявления HAV- IgG в сыворотке или плазме человека.Он предназначен для использования в качестве вспомогательного средства при дополнительной диагностике острой инфекции гепатитом А и исследованиях распространенности среди населения..
Этот комплект использует метод ELISA для обнаружения анти-HAV IgG. Очищенное мышиное анти-человеческое IgG (μцепочечник) антитело покрывается твердой фазой многоствольных колодцев.Конъюгированный HAV-Ag добавляется в покрытые скважины после добавления разбавленного образца и инкубации.Если в образце присутствует HAV-IgG, образуется комплекс Anti-μ-chain-HAV-IgG -HAV-Ag, маркированный HRP.Промыть колодцы для удаления других неограниченных компонентов сыворотки, инкубируют с субстратом (TMB) для образования цветного продукта и измеряют абсорбцию при 450 нм, чтобы указать наличие или отсутствие HAV-IgG в образце.воспроизводимые и простые в эксплуатации.
Основные компоненты
1Противо-мкм-цепочка покрытая микроволновая пластина
2Конъюгант фермента (HAVAg-HRP)
3. Соедините HAV-Ag
4Сером отрицательного контроля.
5. Положительный контроль сыворотки
6. 20 X Буфер для промывки (разбавление перед применением)
7. Субстрат А
8Субстрат B.
9Остановите решение.
10Пластиковый пакет.
11. Галочная бумага
12Руководство.
Процедура испытания
1Принесите комплект ELISA для антител IgM к вирусу гепатита А (все реагенты) и выведите образцы к комнатной температуре перед использованием (приблизительно 30 минут).
2Разбавьте концентрированный буфер 1:19 с ddH2О.
3Пробу разбавляют (1:1000) физиологическим раствором.
4Для каждого испытания устанавливается один пустой, два положительных и три отрицательных контрольных.
5Добавьте 100 мкл разбавленного образца в другие испытательные колодцы.
6Покрыть колодцы герметической бумагой, затем инкубировать 30 минут при температуре 37°C.
7. Выбросить жидкость во все колодцы и заполнить колодцы раствором для стирки. Отложить на 15 секунд, выбросить жидкость во все колодцы и заполнить колодцы раствором для стирки.Повторить 5 раз и высушить колодцы после последней стирки.
8Добавьте 50 мкл конъюгированного HAV-Ag в каждую скважину, кроме пустой.
9Добавьте в каждую скважину 50 мкл конъюганта фермента, за исключением пустого.
10Покрыть колодцы герметической бумагой, затем инкубировать 30 минут при температуре 37°C.
11Повторите шаг 7.
12Добавить в каждую скважину 50 мкл субстрата А и B соответственно, мягко защитить от света и инкубировать в течение 15 минут при температуре 37°C.
13Добавьте в каждую скважину 50 мкл стоп раствора, чтобы остановить реакцию, включая пустую скважину.
14Измеряют абсорбанцию на 450 нм по сравнению с пустым, или измеряют абсорбанцию на 450 нм/630-690 нм.