Анализ иммуносорбента, связанного с ферментами, для обнаружения HBsAgв сыворотке или плазме

HBsAg EIA представляет собой одновременный сэндвичный иммуноанализ твердой фазы, который использует моноклональные антитела и поликлональные антитела, специфические для HBsAg.Микротитер хорошо покрыт моноклональными антителами, специфичными для HBsAg.. Образец сыворотки добавляется в покрытые антителами микротитерские колодцы вместе с конъюгированными ферментами поликлональными антителами. HBsAg, если он присутствует, образует антитело-HBsAg-антитело-энзимный комплекс.Затем пластину промывают, чтобы удалить не связанный материал.Наконец, раствор субстрата добавляется в колодцы и инкубируется. Синий цвет будет развиваться пропорционально количеству HBsAg, присутствующего в образце. The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen..

Материалы, поставляемые вместе с набором:

Процедура испытания:

Все реагенты перед применением должны привести в равновесие до комнатной температуры.

1. Выделять одну каплю (50μl) положительного контроля и отрицательного контроля в двух экземплярах в соответствующие колодцы.и 50уль образцов сыворотки или плазмы в соответствующие испытательные скважины.
2. Добавьте одну каплю (50 мкл) конъюгата фермента в каждую колодцу.Не добавляйте Enzyme Conjugate в пустой колодец.
3. Поместить микротитерные пластины в увлажненную коробку и инкубировать при температуре 37°C в течение 30 минут.
4. Промыть каждую скважину 5 раз, заполнив каждую скважину разбавленным буфером для стирки, затем энергично перевернуть тарелку, чтобы вывести всю воду, и на несколько секунд перекрыть край скважин на абсорбирующей бумаге.
5. Добавьте одну каплю (50μl) раствора субстрата А (HRP-субстрата) в каждую скважину, затем добавьте одну каплю (50μl) раствора субстрата B (TMB) в каждую скважину.
6. Добавьте 1 каплю (50μl) стоп-раствора в каждую скважину, чтобы остановить цветовую реакцию.Вы можете прочитать значение OD на 450 нм с помощью однофильтрового считывателя пластины. (используя значение OD пустой скважины для коррекции всех показаний OD со всех скважин)