Изофермент MB киназы креатина крысы; Набор CK-MB ELISA

• Для количественного in vitro определения концентрации изофермента MB киназы креатина крысы (CK-MB) в сыворотке крысы, плазме, культурных средах или любой биологической жидкости.

Принцип

Этот набор ELISA использует сэндвич-ELISA как метод. Stripplate Microelisa обеспеченное в этом наборе былопокрыто с антителом специфическим к стандартам изофермента MB киназы креатина (CK-MB) или образцы добавлены к соотвествующим колодцам stripplate Microelisa и совместили к специфическому антителу. После этого пероксидаза хрена (HRP) - проспряганное антитело специфическое для изофермента MB киназы креатина (CK-MB) добавлена к каждому stripplate Microelisa хорошо и инкубирована. Свободные компоненты помыты прочь. Решение субстрата TMB добавлено к каждому колодцу. Только те колодцы которые содержат изофермент MB киназы креатина (CK-MB) и HRP проспрягали антитело изофермента MB киназы креатина (CK-MB) покажутся голубыми в цвете и после этого повернутся желтым после добавления решения стопа. Оптически плотность (OD) измерена спектрофотометрически на длине волны 450 nm. Значение OD пропорционально к концентрации изофермента MB киназы креатина (CK-MB). Вы можете высчитать концентрацию изофермента MB киназы креатина (CK-MB) в образцах путем сравнивать OD образцов к стандартной кривой.

Материалы обеспеченные с набором

• Разбавление стандартов

10 колодцев установили для стандартов в stripplate Microelisa. В хорошо 1 и хорошо 2, стандартное решение 100μl и стандартный буфер разбавления 50μl добавлены и смешаны хорошо. В хорошо 3 и хорошо 4, решение 100μl от хорошо 1 и хорошо 2 добавлено соответственно. После этого стандартный буфер разбавления 50μl добавлен и смешан хорошо. решение 50μl сброшено от колодца 3 и хорошо 4. В хорошо 5 и хорошо 6, решение 50μl от хорошо 3 и хорошо 4 добавлено соответственно. После этого стандартный буфер разбавления 50μl добавлен и смешан хорошо. В хорошо 7 и хорошо 8, решение 50μl от хорошо 5 и хорошо 6 добавлено соответственно. После этого стандартный буфер разбавления 50μl добавлен и смешан хорошо. В хорошо 9 и хорошо 10, решение 50μl от хорошо 7 и хорошо 8 добавлено соответственно. После этого стандартный буфер разбавления 50μl добавлен и смешан хорошо. решение 50μl сброшено от колодца 9 и хорошо 10. После разбавления, полный том во всех колодцах 50μl и концентрация 15ng/ml, 10 ng/ml, 5ng/ml, 2.5ng/mland1.25ng/ml, соответственно.

Вычисление результатов

  Известная концентрация стандарта изофермента MB киназы креатина крысы (CK-MB) и своего соответствуя чтения OD проложена курс в масштабе журнала (x-оси) и масштабе журнала (Y-osи) соответственно. Концентрация изофермента MB киназы креатина крысы (CK-MB) в образце определена черчением O.D. образца на Y-osи. Первоначальная концентрация высчитана путем умножать множитель дилюции.

Точность

точность Intra-assay (точность в пределах assay): 3 образца с низким, средним и высокопоставленным изоферментом MB киназы креатина крысы (CK-MB) были испытани 20 раз по одна плита, соответственно.

точность Интер-assay (точность между assays): 3 образца с низким, средним и высокопоставленным изоферментом MB киназы креатина Rt (CK-MB) были испытани по 3 различных плиты, 8 копий в каждой плите.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-Assay: CV<10>

Интер-Assay: CV<12>

Ряд Assay

0,28 ng/ml - 18 ng/ml

Чувствительность:

0,04 ng/ml