Тест набора 96 HAV IgM Elisa/набор

Catolog нет: BE301A

1. ПРИНЦИП

1. Этот набор использует метод захвата ELISA для того чтобы обнаружить анти--HAV IgM. Очищенное антитело IgM мыши анти--человеческое (μchain) покрыто на твердом участке мульти-колодцев.
2. Сопраженный HAV-Ag добавлен к покрытым колодцам после того как разбавленный образец добавил и инкубировал. После этого пероксидаза хрена обозначила HAV-Ag добавлена. Если HAV-IgM присутствует в образце, то комплекс Анти--μ-цепи-HAV-IgM – HAV-Ag - обозначенный с HRP сформирует.
3. Колодцы мытья для того чтобы извлечь другие unbounded компоненты сыворотки, инкубируют с субстратом (TMB) для того чтобы сформировать покрашенный продукт, и измеряют absorbance на 450nm для указания присутсвия или отсутствия HAV-IgM в образце.
4. Тест особенный, чувствительный, возпроизводимый и легкий для того чтобы работать.

2. ОБЕСПЕЧЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ

1. Анти--μ-цепь покрыла блок плиты 1 Microwell (96wells)
2. энзим Conjugant (HAVAg-HRP) 1 бутылка (6ml)
3. сопраженная 1 бутылка HAV-Ag (6ml)
4. пробирка сыворотки 1 управлением недостатка (1ml)
5. пробирка сыворотки 1 надежного управления (1ml)
6. буфер мытья 20 x (разбавление до пользы) 1 бутылка (30ml)
7. бутылка субстрата a 1 (6ml)
8. бутылка b 1 субстрата (6ml)
9. остановите решение (2M H2SO4) 1 бутылка (6ml)
10. сумка полиэтиленового пакета 1
11. части уплотнения бумажные 3
12. Руководство 1 по каждому

3. Методика проверки

1. Принесите набор ELISA для антитела IgM к вирусу Гепатита A (всем реагентам), и образцы к комнатной температуре перед использованием (приблизительно 30 минут).

2. Dilute сконцентрировал 1:19 буфера мытья с ddH2O.

3. Разбавьте образец (1:1000) с физиологопсихологическое соляным.

4. Для каждого теста, установите один пробел, 2 положительных и 3 отрицательных контроля. Добавьте сыворотку 100μl положительную и отрицательную контроля в положительные и отрицательные колодцы контроля соответственно.

5. Добавьте образец разбавленный 100μl в другие колодцы теста.

6. Колодцы крышки с бумагой уплотнения, тогда инкубируют 30 минут на 37°C.

7. Сбросьте жидкость во всех колодцах и заполните колодцы с моющим раствором. Положение в сторону на 15 секунд, сбрасывает жидкость во всех колодцах и заполняет колодцы с моющим раствором. Повторите 5 раз и высушите колодцы после последнего Вашингтона.

8. Добавьте HAV-Ag 50 μl сопраженный в каждом колодце за исключением пробела.

9. Энзим Conjugant μl Addμl 50 в каждом колодце за исключением пробела

колодцы 10.Cover с бумагой уплотнения, тогда инкубируют 30 минут на 37°C.

11. Повторите раздел 7.

субстрат a и b μl 12.Add 50 соответственно к каждому колодцу, смешивает нежно защищенный от света и инкубирует 15 минут на 37°C.

13. Добавьте 50μl решения стопа в каждый колодец для того чтобы остановить реакцию, включая пустой колодец.

14. Измерьте absorbance на 450 nm против пробела, или измерьте absorbance на 450 nm/630-690 nm.