РНК лигаза Т4
Категория No/Спецификация: E1015-A/1000 U
Концентрация: 10 U/μL
Описание продукта
Т4 РНК лигаза катализирует формирование АТФ-зависимых фосфодиэстерных связей между 5'- фосфатными группами и 3'- гидроксильными терминами олигонуклеотидов, одноцепочечной РНК,и молекулы ДНК как межмолекулярно, так и внутримолекулярно.
Минимальные субстраты: нуклеотид 3',5'-фосфат в межмолекулярных реакциях и 8-нуклеотидный олигонуклеотид во внутримолекулярных реакциях.
Состояние хранения и срок годности
Хранить при температуре -20°С.
Источник
Рекомбинантный штамм E. coli содержит ген 63, клонированный из бактериофага T4.
Определение единицы
Единица определяется как количество фермента, необходимое для катализации преобразования 1 нмоля 5'-[32P]-(A)12-18 в его кислотоустойчивую форму при 37 °C в течение 30 минут.
Активность фермента определяется в следующей смеси: 50 мМ Tris-HCl (pH 7,5), 10 мМ MgCl2, 10 мМ DTT, 1 мМ ATP и 10 мМ 5'-[32P]-(A) 12-18 (10 мК на 5'-конце).
Сфера применения
- РНК 3'- терминальное маркирование (с использованием цитидина 3', 5'- ди[α-32P] фосфата)
- Лигация РНК на РНК
- Синтез олигорибонуклеотидов и олигодеоксирибонуклеотидов
- Специфическая модификация тРНК
- Лигация олигодеоксинуклеотидов к одноцепочечной cDNA для 5' RACE (быстрая амплификация концов cDNA)
- Специальное производство комплексов ПЦР-примера
Ингибирование и инактивация
- Ингибиторы: хелатирующие вещества металлов, модифицирующие реагенты группы SH.
- Нагреть на 70°C в течение 10 минут.
Этот препарат предназначен только для исследовательских целей.