Термочувствительная щелочная фосфатаза
Номер категории/спецификация: E1013-A/300 U; E1013-B/1000 U; E1013-C/5000 U
Концентрация: 1 U/μL
Описание продукта
Термочувствительная щелочная фосфатаза является новой щелочной фосфатазой, которая проявляет активность в обычно используемых ограничениях.
Эндонуклеазные буферы, а также ПЦР-буферы. Этот фермент катализирует высвобождение 5' и 3' фосфатных групп в ДНК, РНК и нуклеотидах. Кроме того, он может удалять фосфатные группы из белков.Термочувствительная щелочная фосфатаза способна дефосфорилировать все типы конечных ДНК в течение 10 минут при температуре 37 °CФермент инактивируется при нагревании при 75°C в течение 5 минут. Следовательно, нет необходимости удалять щелочную фосфатазу перед лигацией.
Состояние хранения и срок годности
Хранить при температуре -20°C. Продукт действителен 2 года.
Источник
Рекомбинантный штамм E. coli, содержащий ген щелочной фосфатазы, клонированный из бактерий.
Определение единицы
Одна единица определяется как количество фермента, необходимое для дефосфорилирования 5'-концов 1 мкг линейной pUC57 ДНК в DSAP Buffer при температуре 37 °C в течение 10 минут.
Сфера применения
- Дефосфорилирование ДНК клонированного вектора для предотвращения повторной циркуляции во время лигации.
- одновременное ферментативное расщепление и дефосфорилирование ДНК вектора.
- Очистка продуктов ПЦР: деградация нуклеотидов продуктов ПЦР перед секвенированием.
- Дефефосфорилирование 5'- концов нуклеиновых кислот перед маркировкой полинуклеотидной киназы Т4.
- Другие применения, требующие дефосфорилирования субстратов ДНК и РНК.
- Дефосфорилирование белков.