DNase I, RNase-free, HC
Категория No/Спецификация: E1018-A/1000 U
Концентрация: 50 ед/мкл
Описание продукта
DNase I (без RNase) - эндонуклеаза, способная клеймировать как одноцепочечную, так и двуцепочечную ДНК.
фосфодиэстерные связи, образующие одиночные дезоксирибонуклеотиды и олигодезоксирибонуклеотиды с 5'-фосфатными и 3'-OH-группами.
Активность этого фермента строго зависит от Ca2+ и активируется ионами Mg2+ или Mn2+.DNase I разрезает каждую нить dsDNA статистически случайным и независимым способомПри наличии Mn2+ фермент почти перерезает обе нити ДНК в одном месте, в результате чего возникают фрагменты ДНК с тупыми концами или переплетами одного или нескольких нуклеотидов.
Состояние хранения и срок годности
Хранить при температуре -20°С.
Источник
Рекомбинантный штамм E. coli, содержащий клонированный ген, кодирующий говядину DNase I.
Определение единицы
Единица определяется как количество фермента, необходимое для полного разложения 1 мкг ДНК плазмиды в течение 1 минуты при температуре 37 °C.
Активность фермента определяется в следующей смеси: 10 мМ Трис-ГКЛ (pH 7,5 при 25°C), 2,5 мМ MgCl2, 0,1 мМ CaCl2 и 1 мкг ДНК pUC19.
Одна единица DNase I эквивалентна 0, 3 единице Куница.
Особенности
- Рекомбинантный фермент
- Очищенные от неживотного хозяина, с низким уровнем эндогенной РНазы
Сфера применения
- Для получения РНК без ДНК.
- Чтобы удалить ДНК-шаблоны после транскрипции in vitro.
- Чтобы подготовить РНК без ДНК перед RT-PCR и RT-qPCR.
- В сочетании с ДНК полимеразой I для маркировки ДНК через ник-трансляцию.
- Для изучения взаимодействий ДНК- белка с использованием DNase I (RNase- free) отпечатков.
- Для создания библиотеки случайно обрезанных фрагментов ДНК используется буфер реакции, содержащий Mn2+.